高效液相色谱仪的色谱柱基础介绍
高效液相色谱仪的色谱柱基础介绍色谱柱是髙效液相色谱仪的最重要的部件：柱材料、柱规格、柱填料、保护柱、柱接头、链接管。
1. 柱材料常用内壁抛光的不锈钢管作色谱柱的柱管以获得髙柱效。使用前柱管先用氣仿、甲醇、水依次清洗，再用50%的HN03对柱内壁作钝化处理。钝化时使HN03在柱管内至少滞留10 min, 以在内壁形成钝化的氧化物涂层。
2. 柱规格一般采用直形柱管，标准填充柱柱管内径为4.6 mm或3. 9m m ,长10〜50 cm，填料粒度5〜10/xm时，柱效达7000〜10000块/m 理论塔板数。使用3〜5 pm填料，柱长可减至5〜10 cm。当使用内径在0. 5〜1. 0 mm的微孔填充柱或内径为30〜50 pm的毛细管柱时，柱长为15〜50 cm。当使用粗内径短柱或细内径长柱时，应注意由于柱内体积减小，由柱外效应引起的峰形扩展不可忽视。此时应对进样器、检测器和连接接头作特殊设计以减少柱外死体积。这对仪器和实验技术提出了更高的要求。但这样会降低流动相的消耗量并提髙检测灵敏度。
3 .柱填料高效液相色谱柱装填的固定相粒度多为5〜10µm或3〜5 µm,以全多孔球形或无定形硅胶、三氧化二铝、二氧化锆、苯乙烯-二乙烯基苯共聚微球、脲醛树脂微球为基体，其表面经化学改性并经化学键合制成：非极性烷基（C4、Cs、C18) 、苯基固定相，弱极性的酚基、醚基、二醇基、芳硝基固定相和极性腈基、胺基、二胺基固定相；具有磺酸基和季铵基的离子色谱固定相；具有不同孔径的凝胶色谱固定相。近年还研制了以2〜4 µm的非多孔硅胶、二氧化锆和朦醛树脂-二氧化锆复合微球为基体的键合固定相，以解决高分子量的生物大分子蛋白质、核酸的快速分析问题。
4 .保护柱保护柱为内径2.0〜4. 6 m m ,长度不超过3 cm的短柱，填充和分析柱相同的固定相，它的作用是收集、阻断来自进样器的机械杂质和化学杂质，以保护和延长分析柱的使用寿命。保护柱填充的填料是消耗品，通常分析50〜100次样品就应更换，使用保护柱会使分析柱柱效稍有损失，&用得当对分离效果无影响。有些厂商将流路过滤器和保护柱组装成一个单元，安装在进样器和分析柱之间，使用很方便。
5 .柱接头和连接管柱接头通过过滤片与色谱柱管连接，在色谱柱管的上、下两端要安装过滤片，过滤片一般用多孔不锈钢烧结材料。此烧结片上的孔径小于填料颗粒直径，却可让流动相顺利通过，并可阻挡流动相中的极小的机械杂质以保护色谱柱。柱出、入口的连接管的死体积亦应愈小愈好，一般常用窄孔（内径0.13m m )的厚壁（1.5〜2.0 mm) 不镑钢管，以减少柱外死体积。所用柱接头，连接蜾帽，密封圈皆为不锈钢材料。
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